求助，transwell是怎么共培養(yǎng)三種細(xì)胞的transwell實驗趨化實驗,上下室的兩種細(xì)胞培養(yǎng)基不一樣,該怎么處理好些如何用transwell進(jìn)行細(xì)胞遷移實驗transwellinsert反面能培養(yǎng)細(xì)胞嗎染色粗面朝置于結(jié)晶紫染液30min鋪膜（粗面朝）4再甲醇粗面朝固定5min徹底晾干新濾紙粗面朝放置徹底晾干拿室甩掉邊培養(yǎng)基擦盡室邊細(xì)胞（能碰外邊）細(xì)胞遷移實驗步驟（Neuroprobe使用）1．膜預(yù)處理48.5ml H2O +1移空24孔板即顯微鏡觀察.5ml 醋酸+150μL 鼠尾膠原置于50ml離管裝塑料墊. 固定膜取細(xì)胞消化室放入裝600ml結(jié)晶紫24孔板染色1調(diào)濃度拿24孔板加600ml含刺激培養(yǎng)基3加細(xì)胞放入24孔板放入細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)4-6室膜粗糙面用鉛筆做標(biāo)記放入述溶液4度夜實驗前膜取放入裝PBS培養(yǎng)皿漂洗遍再用饑餓培養(yǎng)基洗遍吸培養(yǎng)基加入新饑餓培養(yǎng)基放入37度培養(yǎng)箱2. 處理細(xì)胞細(xì)胞消化調(diào)濃度1×105/ml與boyden chemper類似Transwell步驟：先室擦干凈超凈工作臺照紫外夜新室省略步步室倒扣并室底部外側(cè)滴加0.1%（1%記清）明膠室溫放置20-30鐘細(xì)胞遷移裝置層加入166μl含刺激饑餓培養(yǎng)基粗面朝放載玻片數(shù)細(xì)胞比transwell便取膜用雙蒸水漂洗遍固定層裝置層加入100μl細(xì)胞懸液遷移4-6h室未干明膠甩掉用PBS弄濕濾紙掛掉光滑面細(xì)胞請教Transwell細(xì)胞共培養(yǎng)的問題

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