四、降鈣素原的檢測方法目前 ， 檢測PCT的實(shí)驗(yàn)室方法有很多 ， 不僅可以定性 ， 亦可以定量 。常用的方法有如下幾種：
放射免疫學(xué)分析法
利用人工合成的多克隆抗體特異地識別和連接合成氨基酸降鈣素原 。該方法能檢測正常人的血清PCT ， 可靠敏感度為4pm/mL ， 檢測的是游離PCT、結(jié)合型PCT和降鈣素基因相關(guān)肽前體的混合物 ， 而不能區(qū)分上述三種物質(zhì) 。該法檢測耗時長(19～22h) ， 而且有放射性元素的污染使用受到限制 。
雙抗夾心免疫化學(xué)發(fā)光法(ILMA)
運(yùn)用雙單克隆抗體 ， 其中一個抗體為降鈣素抗體 ， 另一個為抗鈣素抗體 ， 分別結(jié)合到PCT分子的降鈣素和抗鈣素部位 ， 可排除交叉反應(yīng) 。其中一個抗體是光標(biāo)記的 ， 另一個未標(biāo)記的抗體固定在試管的內(nèi)壁 ， 反應(yīng)過程中兩個抗體與PCT分子結(jié)合而形成三明治復(fù)合體 ， 發(fā)光部位于反應(yīng)管的表面 。該法操作簡便 ， 特異性強(qiáng) ， 敏感性高 ， 測定的低限值為0.1ng/mL ， 2h可以出結(jié)果 。
  膠體金比色法
采用膠體金技術(shù) ， 包括膠體金標(biāo)記的抗抗鈣素的單克隆抗體和用作包被的抗降鈣素多克隆抗體 ， 當(dāng)標(biāo)本(血清或血漿)加人標(biāo)本孔 ， 金標(biāo)單克隆抗體與標(biāo)本中的PCT結(jié)合 ， 形成金標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物 。該復(fù)合物在反應(yīng)膜上移動 ， 與固定在膜上的抗降鈣素抗體結(jié)合形成更大的復(fù)合物 。當(dāng)PCT濃度超過0.5ng/mL ， 該復(fù)合物顯示紅色 ， 紅色的深淺與PCT的濃度成正比 ， 與標(biāo)準(zhǔn)比色板比較即可得出PCT的濃度范圍 。結(jié)果分為四級:正常<0.5ng/mL;輕度升高>0.5ng/mL;明顯升高>2ng/mL;顯著升高>10ng/mL 。該法具有快速簡便 ， 易觀察的特點(diǎn) 。
透射免疫濁度法
樣品中的PCT與試劑中的PCT單克隆抗體發(fā)生抗原-抗體反應(yīng) ， 使反應(yīng)液濁度增加 ， 并在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液濁度與所加人抗原的量呈線性關(guān)系 ， 可使用生化分析儀或其它光學(xué)檢測儀器在6O0nm波長處測定反應(yīng)液吸光度值 ， 反應(yīng)液吸光度值與所測PCT濃度成正比 。該測定方法簡便、快速 ， 可自動化 ， 適合于批量檢測 。2005年國內(nèi)已有研制開發(fā)的PCT免疫比濁試劑盒供應(yīng) ， 為PCT的廣泛應(yīng)用提供了方便條件 。雖然免疫透射比濁的方法學(xué)及臨床應(yīng)用尚需做進(jìn)一步的驗(yàn)證 ， 但其應(yīng)用前景非?？春?。

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